掃描電鏡工作者都面臨著一個不能回避的事實，就是所有生命科學(xué)、以及許多材料科學(xué)的樣品都含有液體成分。很多動植物組織含水量達到98%，這是掃描電鏡工作者最難對付的樣品問題。
 
 
冰凍掃描電鏡技術(shù)是克服樣品含水問題的一個快速、可靠和有效的方法。這種技術(shù)還廣泛地被用于觀察一些“困難”樣品，如那些對電子束敏感的具有不穩(wěn)定性的樣品。冰凍掃描電鏡技術(shù)還有一個常被忽略的應(yīng)用領(lǐng)域，即通過不同的時間間隔的樣品溶解來研究動態(tài)過程（工業(yè)上或其他方面應(yīng)用）。
 
 
各種“高壓”模式如vp、*和esem的出現(xiàn)，已允許掃描電鏡觀察未經(jīng)冷凍和干燥的樣品。但是，冰凍掃描電鏡技術(shù)仍然是防止樣品丟失水分的最有效方法，它能應(yīng)用于任何真空狀態(tài)，包括裝置于sem的peltier臺上以及向樣品室內(nèi)沖以水氣。冰凍掃描電鏡還有一些其他優(yōu)點，如具有冷凍斷裂的能力以及可以通過控制樣品升華刻蝕來選擇性地去除表面水分（冰）等。
 
常規(guī)掃描電鏡樣品制備的缺點：
? 皺縮和變形
? 可溶性物質(zhì)被提取
? 可彌散性物質(zhì)的移位
? 機械損傷，脆弱樣品在常規(guī)操作時易損傷
? 制備過程慢（常在24小時以上）
? 有毒試劑
 
冰凍掃描電鏡技術(shù)的優(yōu)點：
? 能保持可溶性物質(zhì)
洋李銹菌（真菌）的冰凍掃描電鏡照片
? 可彌漫物質(zhì)很少移位
? 機械損傷小
? 基本上不用有毒試劑
? 是對樣品進行動態(tài)實驗的唯一方法（不同時間間隔冷凍-在實驗室內(nèi)或外面）
? 過程快，從新鮮材料到觀察冷凍、斷裂和噴涂樣品可在5分鐘內(nèi)進行
? 高分辨能力（與低真空技術(shù)相比）
? 通過低溫斷裂獲取額外信息（與常規(guī)和低真空sem方法比較）
? 很適合液體、半液體、和電子束敏感樣品
? 具有選擇性刻蝕能力（通過升華顯露內(nèi)在信息）
? 具有重復(fù)使用樣品能力（例如：對樣品重復(fù)斷裂和涂覆）
 

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上海釜誠生物科技有限公司
劉振
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